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FITC-Antonia Red-dextran 20

FITC-Antonia Red-dextran 20 FITC-Antonia Red-葡聚糖 20

介紹

FITC-Antonia Red-葡聚糖 20

貨號:FARD20

規格:1mg, 5mg

應用:細胞或組織中pH指示劑

品牌:Tdb Labs

產品描述

FITC-安東尼亞紅-葡聚糖 20

CAS 編號: N/A
別名: FARD
FITC-Antonia Red-葡聚糖 (FARD) 是一種葡聚糖衍生物,標記有兩個熒光團 FITC 和 Antonia Red(見圖 1),目前生產的分子量為 20 kDa。

結構和物理特性
從結構上看,每個熒光團(FITC 和 Antonia Red)都通過硫代氨基甲酸酯鍵與葡聚糖結合(圖 1)。每個熒光團的取代度 (DS) 范圍為每摩爾葡萄糖單元 0.001 至 0.020 摩爾染料。與葡聚糖結合的 FITC/AR 摩爾比可在 1:1 和 1:3 之間變化,并在中性 pH 下通過分光光度法進行評估。

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圖 1. FITC-Antonia Red-葡聚糖 (FARD) 的結構示意圖

由于葡聚糖的雙重熒光標記,FITC-Antonia Red-dextran在 λ ex =493 nm光激發下(由于 FITC)在 λ fl =517±5nm 處顯示熒光發射,而在 λ ex =585±5nm nm 光激發下(由于 AR)在 λ fl =600±5nm 處顯示熒光發射。

TdB Labs 產品的特別之處在于,其中一個熒光團 (FITC) 的熒光(以及吸光度)高度依賴于 pH 值,而另一個熒光團 (AR) 的相應熒光在 pH 值 2 至 10 之間幾乎保持不變(見圖 2)。這可以準確測定活細胞或組織中的 pH 值,從而使該產品成為活體顯微鏡的寶貴工具。

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圖 2. 紫外可見光譜描繪了 FARD 的兩個可見特征隨 pH 值變化的依賴關系

在一系列涉及 FARD20(pH 探針)在水溶液中的實驗中,同時記錄了兩種熒光團的熒光光譜(FITC:中心波長為 520 nm 的綠色熒光和 Antonia Red TM:中心波長為 600 nm 的紅色熒光),同時 pH 值在 3.0 和 8.0 之間變化(圖 3)。Labbot幫助我們可視化了FITC(“工作熒光團”)的 pH 依賴性以及 Antonia Red TM的 pH 非依賴性。

圖片 3

圖 3. pH 探針 FARD20 在不同 pH 值下記錄的發射光譜

圖片4

圖 4. FARD20 的兩個熒光峰之間的比率圖(藍色圓圈),以及與 Henderson-Hasselbalch 方程的擬合圖(紅色虛線)

繪制 FITC 與 Antonia Red TM的熒光強度與 pH 之比,可得到一條特征性 S 形曲線(圖 4),該曲線描述了 FARD20 pH 探針的性能和 pH 響應性。確定的 pKa 值為 5.91,與 FITC(工作熒光團)的標準行為相對應。記錄數據與 Henderson-Hasselbalch 方程的擬合度很好,表明當酸和其共軛堿 FITC 形式的濃度相等時,FARD20 溶液的 pH 等于 pKa=5.91(見圖 5)。值得注意的是,與“游離”熒光素(pKa=6.5)相比,FARD20 上結合的酸性和堿性熒光素(分別為單陰離子和雙陰離子)的 pKa 略低,這表明 S 形曲線向較低 pH 值移動,從而使 FARD20 的比率活性跨度增加約。 0.6 pH 單位。

圖片5

圖 5. 描繪 FARD20 酸/堿形式的相對濃度的圖

儲存和穩定性
FARD20 應在室溫下密封在黑暗處儲存。

溶解性
FARD20 呈淺棕色至深紫色粉末或晶體,易溶于水和 DMSO。但是,它與強氧化劑不相容。

應用
FARD20 適用于需要精確檢測和監測活細胞或組織中 pH 值的應用,它可以在 3.5 至 8.0 的廣泛 pH 范圍內運行。


https://tdblabs.se/wp-content/uploads/2023/03/fard.pdf


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