Rainbow Calibration Particles (RCP) 流式校準微球
1. 產品核心定位
Rainbow Calibration Particles (RCP) 是Spherotech公司開發的多峰流式校準微球,專為流式細胞儀的全面性能驗證設計,核心功能包括:
多通道線性校準:通過多峰設計驗證PMT檢測器的線性動態范圍。
長期性能追蹤:穩定的熒光特性支持數月甚至數年的儀器穩定性監控。
靈敏度測試:額外低強度峰(如RCP-30-5A)可評估儀器檢測下限。
2. 產品技術特性
特性說明
多峰設計 單一樣本含4-8個熒光強度峰(如RCP-30-5為6峰,RCP-30-5A為8峰)
寬光譜覆蓋 激發波長365-650 nm,覆蓋FITC、PE、PE-Cy5、APC等主流通道
卓越穩定性 熒光染料包埋于微球內部,耐受凍融循環,70%乙醇處理不影響性能
定量校準 每個峰對應特定MEF值(如MEFL、MEPE),可繪制校準曲線計算線性度(R²≥0.999)
3. 核心應用場景
PMT線性度驗證
通過校準曲線(Relative Channel Number vs. MEF)計算斜率、截距和R²值,確保PMT在寬動態范圍內保持線性響應(文獻中R²普遍>0.999)。
示例:RCP-30-5A在BD Fortessa™ X-20上的APC通道線性度R²=0.9995(見Page 10數據)。
儀器靈敏度評估
RCP-30-5A的額外低強度峰(Peak 1-2)可檢測儀器對弱信號的捕獲能力,適用于低表達靶標研究。
多激光系統校準
兼容BD、Beckman Coulter、CytoFLEX等多平臺(文獻驗證機型包括LSRFortessa™、FACSymphony™、Guava easyCyte等)。
標準化實驗流程
通過預設目標通道數(Target Channel)實現跨實驗室數據可比性。
4. 技術優勢與創新點
非光譜匹配設計:熒光染料不與常用抗體染料(如FITC、PE)重疊,避免交叉干擾,提升校準特異性。
凍存穩定性:稀釋后微球可冷凍保存重復使用,降低成本(Page 1明確提及)。
自動化支持:提供免費Excel模板自動生成校準報告,簡化QC流程。
5. 使用建議
校準流程
步驟1:取3-5滴RCP原液用鞘液稀釋至1 mL,渦旋混勻。
步驟2:上機采集數據,設門排除聚集體(FSC vs SSC)。
步驟3:記錄各峰通道數,比對MEF值生成校準曲線。
質控頻率
日常QC:每周運行RCP-30-5驗證線性度。
靈敏度測試:每月使用RCP-30-5A評估弱信號檢測能力。
數據解讀
警戒值:若R²<0.995或CV>10%,需檢查光學系統或PMT狀態。
總之
Rainbow Calibration Particles (RCP) 是流式細胞儀性能驗證的“黃金標準”工具,其價值體現在:
多峰梯度設計:一站式解決線性度、靈敏度、動態范圍驗證需求。
跨平臺兼容性:覆蓋主流機型,支持長期追蹤。
標準化輸出:通過MEF值和校準曲線實現跨實驗室數據對標。
特別推薦RCP-30-5A作為高端流式細胞儀(如BD FACSymphony™)的核心質控微球,其8峰設計可全面評估儀器性能極限。
| 關鍵產品型號對比 |
|
|
|
| 貨號 |
粒徑(µm) |
峰數 |
特殊功能 |
適用場景 |
| RCP-30-5 |
3.0-3.4 |
6峰 |
標準6峰,覆蓋常規熒光通道 |
日常線性校準、動態范圍驗證 |
| RCP-30-5A |
3.0-3.4 |
8峰 |
增加2個低強度峰,提升靈敏度檢測能力 |
高靈敏度儀器驗證(如BD FACSymphony™) |
| RCP-60-5 |
6.0-6.4 |
6峰 |
大粒徑設計,適合特殊流體系統 |
微流控或大孔徑儀器校準 |
| RCP-05-5 |
0.4-0.6 |
4峰 |
小粒徑,模擬外泌體或微小顆粒 |
納米流式或高分辨率檢測 |
| 與同類產品差異化 |
|
|
|
|
對比維度
|
Rainbow Calibration (RCP) |
Rainbow Fluorescent (RFP) |
Ultra Rainbow (URCP) |
| 峰數 |
多峰(4-8峰) |
單峰 |
多峰(6峰) |
| 核心用途 |
線性度/靈敏度驗證 |
光學校準 |
UV-遠紅全光譜校準 |
| 熒光強度 |
梯度分布(含低強度峰) |
單一高/中強度 |
高強度+增強UV/遠紅信號 |
| 典型CV值 |
各峰CV≤7%(文獻數據) |
≤3%(單峰) |
≤5% |
如果您對質控有不解之處,請聯系東莞漢諾